以下に示すELISAサンプルの収集および保存条件は一般的なガイドラインとして意図されています。具体的なプロトコルは細胞株または組織の種類によって異なる場合があります。サンプルを長期間保存する場合は、サンプルの安定性を確認することを推奨します。すべてのサンプルタイプについて、繰り返しの凍結融解サイクルは避けてください。
血清
血清分離チューブ（SST）を使用し、室温で30分間凝固させた後、1000 x gで15分間遠心分離します。血清を取り出して直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
血漿
EDTA、ヘパリン、またはクエン酸を抗凝固剤として使用して血漿を採取します。採取後30分以内に1000 x gで15分間遠心分離します。直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
血小板除去血漿
EDTA、ヘパリン、またはクエン酸を抗凝固剤として使用して血漿を採取します。採取後30分以内に1000 x gで15分間遠心分離します。血小板を完全に除去するために、血漿を2-8 °Cで10,000 x gで10分間遠心分離する追加の工程を推奨します。直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
細胞培養上清
500 x gで5分間遠心分離して微粒子を除去します。上清を取り出して直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
組織ホモジネート
組織ホモジネートの調製は組織の種類によって異なります。余分な血液を除去するために組織を1X PBSですすぎ、20 mLの1X PBSでホモジナイズして≤ -20 °Cで一晩保存します。細胞膜を破壊するために2回の凍結融解サイクルを行った後、ホモジネートを5000 x gで5分間遠心分離します。上清を直ちに取り出してアッセイを行います。または、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
細胞ライセート
細胞を溶解バッファーに溶解させ、氷上で30分間放置します。14,000 x gで5分間遠心分離して不溶性物質を除去します。上清を新しいチューブに分注し、残りの全細胞抽出物を廃棄します。全タンパク質アッセイを使用して全タンパク質濃度を定量します。直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
組織ライセート
組織をPBSですすぎ、1-2 mmの断片に切り、PBS中で組織ホモジナイザーを使用してホモジナイズします。プロテアーゼ阻害剤を含むRIPAバッファーを等量加え、室温で30分間穏やかに攪拌して組織を溶解します。遠心分離してデブリを除去します。全タンパク質アッセイを使用して全タンパク質濃度を定量します。直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
唾液
唾液をチューブに採取し、10,000 x gで5分間遠心分離します。水層を回収し、直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
尿
一日の最初の尿（中流尿）を無菌的に採取し、無菌容器に直接排出します。遠心分離して微粒子を除去します。直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
母乳
2-8 °Cで1000 x gで15分間遠心分離します。水層を回収し、このプロセスを合計3回繰り返します。直ちにアッセイを行うか、アリコートに分けて≤ -20 °Cで保存します。
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